Méthode d’essai classique :

Lethal/paralytic challenge test in the batch potency testing of tetanus toxoid vaccines for human use
[test de provocation létale ou paralytique pour l’épreuve de puissance des lots de vaccins à usage humain contenant de l’anatoxine tétanique] (méthodes A et B, PhEur 2.7.8)

Méthodes de rechange pour les essais :

Titre et description :

ELISA procedure for Batch Potency Testing of Tetanus Vaccines
[technique ELISA pour l’épreuve de puissance des lots de vaccins contre le tétanos]

La technique in vitro ELISA permet de calculer approximativement le titre d’anticorps tétaniques dans le sérum des cobayes immunisés. Des dilutions successives du  sérum à l’essai et d’un sérum normal sont incubées sur des microplaques recouvertes d’anatoxine tétanique. Le conjugué peroxydase d’immunoglobuline G de chèvre-cobaye est ajouté et la quantité d’anticorps tétaniques qui se lie aux anatoxines est visualisée par l’ajout d’un substrat. Le titre d’anticorps est calculé approximativement en comparant la courbe dose-effet du sérum à l’essai à celle du sérum normal.

Validation :

UE : validation de la méthode d’essai approuvé par l’ECVAM (2000)

Statut réglementaire :

UE : acceptée par l'UE et inscrite à la PhEur (méthode C, 2.7.8) (2003)

Incidence, possible ou réelle, sur l’utilisation d’animaux d’expérimentation :

Réduction
(analyse à l’aide d’une seule dilution plutôt qu’une analyse à dilutions multiples)

Raffinement
(la mort ne constitue pas un point limite)

Références :

• Conseil de l'Europe (CE) (2003) 2.7.8 Titrage de l’activité du vaccin tétanique adsorbé. Dans: Pharmacopée européenne. Strasbourg, France: CE.
• ECVAM (2000) ESAC Statement on the Application of the ELISA Procedure for Batch Potency Testing of Tetanus Vaccines for Human Use.

Dernière révision :

mai 2012